„Naujojoje koronarinio viruso pneumonijos diagnostikos ir gydymo programoje (Devintasis bandymas)“ naudojama nukleino rūgščių aptikimo Ct vertė ≥35, kaip vienas iš svarbių pagrindų, leidžiančių paleisti izoliaciją arba išleisti.Taigi, ką reiškia nukleorūgščių aptikimo rinkinio Ct vertė?Ar skirtingų rinkinių Ct vertės yra palyginamos?Ar kuo mažesnė Ct vertė, tuo geresnis rinkinio veikimas?
Ct reikšmė (Threshold Cycle, Ct) – tai PGR ciklų skaičius, kai realaus laiko fluorescencinio kiekybinio fluorescencijos signalo intensyvumas viršija nustatytą slenkstį.Nukleino rūgščių aptikimo rinkiniai kaip pavyzdį pateikia naują karūnėlę.Tai pačiai to paties rinkinio reakcijai aptikti du viruso turinčius mėginius A ir B, Ct reikšmės dydis tam tikru mastu atitinka viruso geno kopijų skaičių, ty viruso kiekį.Kuo mažesnis B mėginio Ct, tuo didesnis viruso kiekis.Ct vertė yra atvirkščiai proporcinga viruso kiekiui ir jo užkrečiamumui.Įvairių realaus laiko fluorescencijos kiekybinių rinkinių privalumai ir trūkumai negali būti vertinami tik pagal Ct vertės dydį, nes skirtingų rinkinių Ct vertės nėra palyginamos.Rinkinio veikimo įvertinimas turi būti vertinamas atsižvelgiant į jautrumo (minimalios aptikimo ribos), specifiškumo, tikslumo, stabilumo ir diagnostikos taikymo aspektus.Kiekvienas reagentų gamintojas turi savo aštuoniolika kovos menų rūšių, ir jie turi savo magiškų galių, todėl čia nesileisiu.
Įprastų realaus laiko kiekybinės PGR (QPCR) analizės instrumentų / sistemų atveju Ct verčių gavimas ir platus jų naudojimas patogenų aptikimo programose yra žinomi visiems.Plėtojant pramonę ir tobulėjant technologijoms, QPCR įranga ir reagentai susidūrė su galimybėmis ir iššūkiais.„Yiou Think Tank“ (2021 m. tyrimų ataskaita apie Kinijos genetinių tyrimų pramonę: technologija) išanalizavo, kad dauguma mano šalies QPCR pramonės įmonių susiduria su bendromis technologijomis pagrįstomis problemomis.Atsižvelgiant į šias problemas, sprendimai daugiausia skirstomi į du tipus: spartinamas technologijų tobulinimas ir naujų technologijų diegimas.
POCT QPCR molekulinei diagnostikai yra viena iš pramonės plėtros krypčių, o našumo gerinimas yra svarbus veiksnys, paspartinantis technologijos taikymą.POCT įrangai su vieno mėginio QPCR pralaidumu, kaip optimizuoti vienos reakcijos pagrindinio parametro Ct vertę atliekant MTTP?Ta pati įranga, ta pati reakcijos sistema ir ta pati šablono koncentracija, teoriškai kuo didesnė vienos reakcijos Ct reikšmė, tuo mažesnis fermento efektyvumas reakcijoje.
Gerinant fermentinės reakcijos efektyvumą ir optimizuojant Ct vertę, pirmiausia galima išanalizuoti tipinę 40 PGR ciklo fluorescencijos kiekybinės amplifikacijos kreivę.Amplifikacijos kreivė toliau pateiktame paveikslėlyje yra padalinta į fluorescencijos fono fazę, eksponentinę amplifikacijos fazę, linijinę fazę ir plokščiakalnio fazę.Norint pasiekti mažesnį fluorescencinį foną, kiek įmanoma atskirti jį nuo ankstyvos eksponentinės amplifikacijos fluorescencijos vertės, būtina tirti iš reakcijos medžiagų nešiklio, pradmenų zondo konstrukcijos atrankos ir reakcijos buferinės sistemos.Eksponentinis amplifikacijos periodas yra pati tiesiausia fermento aktyvumo reakcija, be to, tai yra puikaus POCT įrangos, reakcijos nešėjų ir reagentų derinimo įrodymas.Šiuo metu įrangos temperatūros valdymas, optinio signalo gavimas ir analizė, nešiklio biologinis suderinamumas ir reagentų sistemos veikimas turi būti sureguliuoti ir išbandyti visais aspektais.Galiausiai visas stiprinimas baigtas, o rezultatai turi būti pateikti naudojant griežtą duomenų algoritmą, kad būtų gauta pagrįsta Ct vertė.
Mažas žingsnis optimizuojant Ct vertę yra daugybė mokslinių tyrimų ir plėtros darbuotojų žingsnių.Dienos ir nakties nerime ir jaudulyje kiekvieną kartą, kai „kalnai ir upės niekur nematyti, gluosniai tamsūs, gėlės žydi ir yra kitas kaimas“, o tai suteikia drąsos ir aistros judėti pirmyn. vėl.
Paskelbimo laikas: 2022-09-29